洗滌劑抑菌試驗(yàn)方法有哪幾種

12次 2025.06.23

　　?洗滌劑中的“抑菌”是指通過抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)和繁殖，將其數(shù)量控制在無(wú)致病風(fēng)險(xiǎn)的范圍內(nèi)，而不是完全殺滅細(xì)菌??。根據(jù)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，抑菌型洗滌劑的效果是通過抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)來實(shí)現(xiàn)的，其抑菌率需達(dá)到50%以上?。洗滌劑抑菌試驗(yàn)有哪些方法步驟？


洗滌劑抑菌試驗(yàn)


　　?洗滌劑抑菌試驗(yàn)方法


　　1、抑菌環(huán)法


　?。?）試驗(yàn)原理


　　將含有洗滌劑的樣品放置在接種有指示菌的培養(yǎng)基表面，洗滌劑中的抑菌成分向周圍擴(kuò)散，形成抑菌區(qū)域，通過測(cè)量抑菌環(huán)的直徑來判斷洗滌劑的抑菌能力。


　　（2）具體操作


　　將冷卻至50℃左右的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基傾注于無(wú)菌平皿中，每皿約15-20mL，待其凝固。用無(wú)菌移液器吸取0.1mL指示菌菌懸液，均勻涂布于瓊脂平板表面。


　　將無(wú)菌牛津杯（或浸有樣品的濾紙片）輕輕放置在涂布好菌液的平板上，每個(gè)平板放置3-4個(gè)，注意保持適當(dāng)間距。將平板置于（35±2）℃培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)18-24h（細(xì)菌）或48h（酵母菌）。


　?。?）結(jié)果觀察


　　培養(yǎng)結(jié)束后，測(cè)量抑菌環(huán)直徑（從牛津杯或?yàn)V紙片邊緣到抑菌圈邊緣的垂直距離），以毫米（mm）為單位記錄。抑菌環(huán)直徑越大，表明洗滌劑的抑菌效果越強(qiáng)。同時(shí)需設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照（已知有抑菌作用的物質(zhì)）和陰性對(duì)照（無(wú)菌水或無(wú)抑菌作用的溶劑）。


　　2、懸液定量法


　?。?）試驗(yàn)原理


　　通過測(cè)定洗滌劑溶液與菌懸液混合作用后，殘留的活菌數(shù)量，計(jì)算抑菌率，從而評(píng)估洗滌劑的抑菌效果。


　?。?）具體操作


　　吸取5mL洗滌劑樣品稀釋液（若測(cè)試原液，直接取5mL原液）放入滅菌試管。向試管中加入0.5mL實(shí)驗(yàn)菌液，迅速混勻并開始計(jì)時(shí)。達(dá)到規(guī)定作用時(shí)間后，立即吸取0.5mL混合液，加入到含有4.5mL滅菌的中和劑（或PBS）的試管中，中和10min。


　　中和結(jié)束后，吸取1mL該溶液至培養(yǎng)皿中，傾注適宜的培養(yǎng)基（如營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基用于細(xì)菌，沙氏瓊脂培養(yǎng)基用于酵母菌），待培養(yǎng)基凝固后，倒置平板，于（35±2）℃培養(yǎng)48h（細(xì)菌）或72h（酵母菌）。


　　培養(yǎng)結(jié)束后，進(jìn)行活菌菌落計(jì)數(shù)。同時(shí)設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照組（菌懸液+PBS）、陰性對(duì)照組（中和劑+PBS）和中和劑對(duì)照組（菌懸液+中和劑）。


　?。?）結(jié)果計(jì)算


　　抑菌率（%）=[（陽(yáng)性對(duì)照組平均菌落數(shù)-試驗(yàn)組平均菌落數(shù)）÷陽(yáng)性對(duì)照組平均菌落數(shù)]×100%


　　3、載體浸泡定量法


　?。?）試驗(yàn)原理


　　將染菌的載體浸泡在洗滌劑溶液中，經(jīng)過一定時(shí)間作用后，檢測(cè)載體上殘留的活菌數(shù)量，計(jì)算抑菌率，以評(píng)估洗滌劑對(duì)載體上細(xì)菌的抑制作用。


　?。?）具體操作


　　制備染菌載體：將無(wú)菌載體浸泡在指示菌菌懸液中，取出后瀝干或干燥，使載體上的菌量達(dá)到一定濃度（如1×10?-1×10?cfu/載體）。


　　取染菌載體放入含有洗滌劑溶液的試管中，按規(guī)定的溫度和時(shí)間進(jìn)行浸泡。浸泡結(jié)束后，取出載體，放入含有中和劑的試管中，振蕩一定時(shí)間，使載體上的細(xì)菌被充分洗脫。取洗脫液進(jìn)行活菌菌落計(jì)數(shù)，同時(shí)設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照組（染菌載體+PBS）和陰性對(duì)照組（中和劑+PBS）。


　?。?）結(jié)果計(jì)算


　　抑菌率（%）=[（陽(yáng)性對(duì)照組平均菌落數(shù)-試驗(yàn)組平均菌落數(shù)）÷陽(yáng)性對(duì)照組平均菌落數(shù)]×100%